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羊城晚报：核酸检测为何可以帮助确诊，它是一种什么样的原理？ 张召：导致这次疫情的新型冠状病毒，是一种RNA病毒。我们知道，病毒主要由内部的遗传物质和蛋白质外壳组成。每一种病毒只含一种核酸,不是DNA就是RNA , 如天花病毒是DNA病毒，而艾滋、SARS等，都是RNA病毒，它的遗传物质就是RNA（核糖核酸）。 因此，我们核酸检测的原理，就是通过裂解液，让病毒的RNA裸露出来，再加入反应剂，让它的RNA不断进行扩增和放大，只要里面确实有病毒，它的RNA 就会不断扩增，释放出信号，测出阳性。从理论上来说，核酸检测的灵敏度是非常高的，也是帮助确诊的最重要的手段之一。 羊城晚报：您说灵敏度高，那为何会出现有的病人三四次阴性最后才测出阳性的案例？ 张召：首先，和病毒的发展有关，有的轻症病人可能开始确实反应不强烈，后面病毒才开始显现出来。 更重要的，出现这种情况，要从采集到检测的全过程去分析。核酸检测分为三个步骤，也要分三个“盒子”：第一步是采集，我们称为“采集器”，这一步骤普通病人在家都能自行完成，用棉签拭取咽喉部位的分泌物即可；第二步是提取核酸；第三步是用QPCR试剂盒进行检测。后面两个步骤都只能由检测人员或者医护人员完成。从采集到提取到检测，三个环节，任何一个环节出问题，都有可能导致“假阴性”，可能导致医学上的误判和误诊，酿成悲剧。 羊城晚报：这三个环节可能出现什么样的问题？如何将“假阴性”的可能降到最低呢？ 张召：三个环节可能会出现几种问题。在采集环节，如果用市面上目前普通的采集盒，很可能出现：病毒活着-传染检测人员或者病毒自己降解-提取效果不佳的情形。而在提取环节，市面上的核酸检测盒子多，但质量差别也很大，一方面要裂解蛋白，另一方面要保护RNA，如果质量不过关，就会影响检测效果。 另外，现在需要确诊的疑似病人多，前线检测量非常大，检测人员都是超负荷在工作。他们全副武装，穿防护服，手里都是汗，戴几层手套，操作起来不如以往灵敏。检测时要进行离心、洗脱等很多步骤，有一步操作不佳，对结果影响很大。 我们向一线的检测人员的辛勤工作致敬，希望把误检降至最低，但可能也得包容一定的误检率。因此，前方需要对初检阴性的疑似病人，进行反复检测，以免误诊。 羊城晚报：您刚才提到在采集环节可能出现病毒活着-传染检测人员的情形？ 张召：这次新冠病毒导致的肺炎疫情开始的时候，我们都认为缺核酸提取试剂盒和检测盒，可是亲身参与这一役，我们才知道，目前更缺的不是核酸检测盒，而是第一步骤的“采集盒”。这也是我们这次迅速调整生产方向，抓紧生产口腔/咽拭子标本采集器的原因。 这个不起眼的采集器，是一个5厘米的小管子，里面有棉签和3毫升的灭活液和保存液。要在采集阶段，同时做到杀死病毒和保护RNA。 羊城晚报：非专业人士可能会不明白，病毒都死了，怎么还检测得出来？ 张召：这就是技术难点，我们的灭活液，既要让病毒的蛋白变性，失去活性而“死掉”，不再有传染性，提高运输和检测阶段的安全性；另外一方面，又要防止病毒里的RNA降解。 因为我们之前一直是做人粪菌群的采集，一向非常注意病毒的灭活，国内绝大多数的采集盒都只能存储病毒而不能灭活病毒，而我们是广东省仅有的两家拥有核心技术和生产能力的厂家之一。但我们的库存完全不足以应对疫情，所以才有了这次的加班加点。 羊城晚报记者 曾璇
